Полный справочник медицинской аппаратуры - Коллектив авторов - Страница 48

Если клетки развивающегося эмбриона имеют неправильную форму или отходят от блестящей оболочки, или же скорость деления клеток существенно отличается от описанной выше, то развитие эмбриона считается патологическим и он непригоден для переноса в полость матки.

Оставшиеся эмбрионы хорошего качества могут быть сохранены при очень низкой температуре для дальнейших попыток (криоконсервация эмбрионов).

Так как в большинстве случаев эмбрион переносится в полость матки на стадии 8 или 16 клеток, то это означает, что эмбрион человека перед имплантацией должен содержаться в культуре в течение 3–4 суток.

Эмбрион в 0,05 мл культуральной среды осторожно засасывается в стерильный катетер диаметром 1,4 мм. Затем катетер проводится через цервикальный канал в полость матки, где в области дна эмбрион высвобождается из катетера. С целью облегчения проведения этой процедуры катетер следует разместить по длине для контроля положения его конца в полости матки. Помимо этого, следует очень аккуратно манипулировать шейкой матки во избежание сокращения мышц матки. Если в полость матки переносят более двух эмбрионов, существенно повышается риск многоплодной беременности. После переноса эмбрионов в полость матки назначают препараты прогестерона и эстрогены, чтобы поддержать имплантацию эмбриона. В этом случае говорят о поддержке лютеино-вой фазы.

Контроль подтверждения беременности

Для контроля ранних сроков развивающейся беременности проводят динамическое определение – субъединицы хориониче-ского гонадотропина, которое помогает определить беременность с 7-9-го дня после ТЭ. При наступлении беременности за женщинами ведется постоянное наблюдение методами, принятыми для ведения беременности и родов женщин с отягощенным акушерским анамнезом.

Должно производиться серийное ультразвуковое обследование плода. На 1-7-й неделе беременности определяются положение амниона и сердечная деятельность плода. После этого контроль должен производиться на 20, 28 неделе и далее с целью определения степени развития плода. На основании полученной информации можно наблюдать характеристики роста плода на протяжении беременности и выявить определенную патологию развития скелета. Пункцию амниона можно производить приблизительно на 16-й неделе беременности. Таким образом может быть определен кариотип и уровень фетопротеинов, определяющий наличие дефектов развития нервной трубки плода.

ИКСИ (инъекция сперматозоида в яйцеклетку) – это особая форма ЭКО, применяемая при тяжелых формах мужского бесплодия. При низком содержании подвижных сперматозоидов в эякуляте – тяжелой олигозооспермии и/или астенозооспермии, и/или тератозооспермии вероятность оплодотворения очень мала. Поэтому основной задачей ИКСИ является осуществление проникновения сперматозоида через оболочку яйцеклетки – оплодотворение. Для успешного проведения ИКСИ достаточно наличия в эякуляте единичных живых сперматозоидов.

Показанием к ИКСИ является также тяжелое аутоиммунное бесплодие у мужчин при титре антиспермальных антител в сперме более 50 %. В этом случае, как правило, количество подвижных сперматозоидов существенно снижено.

ИКСИ применяется также при недостаточном оплодотворении в предыдущих попытках (оплодотворено менее 50 %), при малом количестве яйцеклеток.

Под инвертированным микроскопом сперматозоид втягивают в очень тонкую стеклянную иглу и инъецируют непосредственно в яйцеклетку.

Такая микроинъекция имитирует естественный процесс проникновения сперматозоида в яйцеклетку. Эта процедура не оказывает отрицательного влияния на слияние пронуклеусов яйцеклетки и сперматозоида. Если оплодотворение и деление произошло, как и при процедуре ЭКО, спустя 2–5 дней эмбрион переносят в полость матки.

Как только оплодотворение произошло, качество эмбрионов и вероятность наступления беременности после ИКСИ не отличаются от таковых после традиционного ЭКО.

Для осуществления ЭКО необходима рабочая станция, в состав которой входят: ламинарные шкафы, термостаты и подогреваемые поверхности, антивибрационный стол, криоконсерватор, СО₂ инкубаторы, стереомикроскопы.

Ламинарные шкафы и рабочие станции предназначены специально для работы с ооцитами, эмбрионами и спермой в лабораториях ЭКО. Они обеспечивают циркуляцию ламинарного потока воздуха для предотвращения контаминации, класс I биологической защиты (защита материала), имеют встроенную увлажнительную систему и большой выбор опций для формирования рабочей станции ЭКО нужной конфигурации.

Антивибрационные столы обеспечивают оптимальные условия для проведения процедур ЭКО и ИКСИ.

Термостаты и подогреваемый столы необходимы для культивирования и транспортировки половых клеток и эмбрионов в пределах лаборатории в условиях постоянной температуры, как правило, это около 37 °C.

Криоконсерватор необходим для криоконсервации спермы, яйцеклеток и эмбрионов. Имеет модульную структуру и состоит из контроллера температуры, криокамеры и криованны. Такие устройства поддерживают диапазон температур от -120 до +40 °C, имеют несколько предустановленных программ, предупреждающий сигнал при изменении температуры более чем на 1,5 °C, минимальный температурный шаг 0,04 °C, соединение с компьютером.

СО₂-инкубаторы могут быть настольными и портативными разнообразных размеров. Инкубаторы имеют несколько изолированных камер для биоматериала, диапазон поддерживаемой температуры зависит от конструкции прибора, производителя и поставленных целей. Портативные СО₂ инкубаторы имеют встроенную батарею, обеспечивающую бесперебойную работу аппарата при транспортировке образцов, систему тревог по температуре и заряду батареи.

Также для нормальной работы ЭКО-лаборатории необходимы расходные материалы: среды для культивирования, для промывки спермы, пробирки, чашки Петри, 4-луночные планшеты, пипетки, криопробирки, криосоломки, микропипетки для ИКСИ, наконечники для стриппера для очистки ооцитов, наборы для пункций, катетеры для переноса, фильтры для шприцов, стерильное минеральное масло.

Одним из методов исследования зрительного нерва, сосудистой оболочки и сетчатки является офтальмоскопия, существует несколько видов и методов: офтальмоскопия в обратном виде, непрямая бинокулярная, офтальмоскопия в прямом виде и офталь-мохромоскопия. Глазное дно, как правило, исследуют в темном помещении и при широком зрачке, для чего проводят атропини-зацию, противопоказана данная процедура лицам, страдающим глаукомой и с атрофией сфинктера зрачка. При офтальмоскопии оценивают диск зрительного нерва: его форму, цвет (в норме желтовато-розовый), границы. В центре диска имеется углубление – физиологическая экскавация, это место перегиба волокон зрительного нерва. Дают оценку артериям и венам: калибр, извитость, склерозированность.

Световую щель фокусируют на ту ткань, которая подлежит осмотру. Тонкий большой силы световой пучок позволяет получить оптический срез на полупрозрачных и прозрачных тканях. Так, при исследовании роговицы можно видеть ее толщину, неоднородность оптической плотности разных ее слоев, вид и ход нервных веточек, мельчайшие отложения на задней поверхности роговицы. Также можно исследовать ток крови в краевой петлистой сосудистой сети и сосудах коньюнктивы. Отчетливо видны повреждения хрусталика. Можно применять щелевые лампы в сочетании с гониоскопом для исследования угла передней камеры глаза.

Щелевая лампа состоит из осветителя, или собственно щелевой лампы, бинокулярного микроскопа, лицевого установа, координатного и инструментального столиков. Осветитель и микроскоп смонтированы вместе на координатном столике, что обеспечивает в процессе работы их совместное перемещение в разные стороны. В основной части прибора – осветителе – источником света служит электрическая лампа СЦ-69 (6) (6В, 25Вт), питающаяся от общей осветительной сети напряжением 127 или 220 В через понижающий трансформатор. Цоколь лампы впаян в специальную центрирующую обойму, которая помещается в патроне в таком положении, что нить накала лампы располагается вдоль вертикальной осветительной щели. Это обеспечивает наибольшую освещенность вертикального изображения щели. Патрон в корпусе осветителя закрепляется зажимной гайкой. Несколько выше лампы находится конденсор в оправе, состоящий из двух линз, обеспечивающих концентрацию светового пучка, излучаемого лампой. Над конденсором расположен механизм щели.